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                技術支持

                血清儲存以及解凍注意事項
                發布時間:2021-12-07   點擊次數:71次
                需要長期保存的血清必須儲存于-20℃至-70℃低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間切勿超過一個月。  
                由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預留定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。  
                瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:  
                1、-20℃至-70℃血清低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天;  
                2、然后移入室溫或者可以置于37℃水浴中,不斷搖動待全部溶解后再分裝。  
                注意:  
                1、在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與血清成分均一,減少沉淀的發生;  
                2、切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀;  
                3、若一次無法用完一瓶,無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。  
                1)血清化凍為什么是渾濁的?  
                血清制備過程中會保留部分纖維蛋白原,化凍過程中纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白,使血清中出現渾濁,絮狀物。這種情況不影響血清的功效。  
                血清化凍過程中,在37℃水浴中放置時間過長,也會導致沉淀產生,沉淀物包含磷酸鈣結晶。沉淀物也不影響血清功效。  
                去除方法:  
                可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,將上清液加入培養基內一起過濾。也可直接過濾血清以去除這些絮狀物。  
                2)血清熱滅活(除非必須,一般不建議作此熱處理)  
                血清為何要滅活?  
                血清熱滅活是將血清置于56℃水浴至完全解凍??蓽缁钇渲醒a體系統中具有蛋白酶活性的成分。補體是免疫系統的成分。對于那些培養困難的細胞、用于病毒檢測的細胞、用于細胞毒性檢測很重要,可避免補體帶來的不利影響。單熱滅活也破壞血清中的生長因子,所以除非必需,血清才滅活處理。  
                啟動的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究、培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。  
                血清滅活的正確方法  
                (1)按照前面的介紹正確化凍;  
                (2)水浴預熱56℃。水量要足夠,水深要超過瓶中血清的高度;  
                (3)輕輕搖動已解凍的血清,置于水浴中,水位可能會下降;  
                (4)待水溫重新到56℃時,再計時30分鐘;  
                (5)從水浴中拿出血清,待冷卻。-20/-70℃存放。  
                 

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